Если в нашем носу достаточно лактобактерий, он будет здоровым
Если в нашем носу достаточно лактобактерий, он будет здоровым
: 31.05.2020
Микробиом, симбиотическое микробное сообщество человека, в последние годы является предметом интенсивных исследований. Помимо получения фундаментальных знаний, изучение микробиома может принести большую пользу практической медицине. На этот раз под «прицелом» ученых оказались микроорганизмы, обитающие у нас в носу — первом естественном барьере на пути патогенных вирусов, бактерий и аллергенов, проникающих в организм «воздушным путем»
Нашими «соседями» по телу является множество микроорганизмов (микробиом), совокупный вес которых исчисляется килограммами. Большая их часть приносит нам несомненную пользу, выполняя в организме важные функции. К примеру, бактерии, живущие в кишечнике, участвуют в переваривании пищи и синтезе многих необходимых нам соединений, а обитающие на коже — в защите от патогенов (кстати сказать, именно их мы убиваем, используя дезинфектанты и антибактериальное мыло).
К настоящему моменту лучше всего изучен микробиом кишечника, но вот о мельчайших обитателях слизистых верхних дыхательных путей известно на удивление мало. Между тем знания о них могут оказаться очень важными, так как хронические заболевания носоглотки составляют немалую долю болезней человека.
Например, сегодня около 11% европейского населения страдает хроническим риносинуситом — воспалением слизистой носа и околоносовых пазух, при этом антибиотики в данном случае не всегда эффективны. Дело в том, что участие в развитии этого заболевания специфических патогенных бактерий остается спорным: есть мнение, что оно является скорее результатом комплекса нарушений состава микробиома, чем «захватнической деятельности» отдельных микроорганизмов. Если это так, то использование пробиотиков, способствующих нормализации бактериального сообщества, может оказаться более эффективным.
Бельгийские ученые, изучив образцы, взятые у 100 здоровых добровольцев и 225 больных хроническим риносинуситом, обнаружили в слизистой носа здоровых людей на порядок больше лактобактерий (Lactobacillus, молочно-кислых бактерий) — одних из наиболее распространенных симбиотических микроорганизмов человеческого тела, в первую очередь желудочно-кишечного тракта.
В процессе ферментации сахара лактобактерии продуцируют молочную кислоту, подавляющую рост патогенных микроорганизмов. Они предпочитают бескислородную среду либо ту, где кислорода очень мало, поэтому исследователи были удивлены, обнаружив представителей этого рода в хорошо аэрируемом органе. Чтобы убедиться, что они имеют дело не со случайной находкой (лактобактерии могли попасть в нос из ротовой полости), они тщательно изучили характеристики, которые могли помочь лактобактериям существовать в таких нехарактерных для них условиях.
Оказалось, что некоторые бактериальные штаммы несут гены, кодирующие ферменты каталазы, с помощью которых они могут нейтрализовать вредные эффекты кислорода — так называемый окислительный стресс. Кроме того, у них были обнаружены фимбрии — ворсинки, помогающие надежно прикрепляться к клеткам слизистой носа.
Культивирование отобранных штаммов вместе с золотистым стафилококком, гемофильной палочкой и бактерией Moraxella catarrhalis — ключевыми патогенами верхних дыхательных путей, показало, что бактерия L. casei подавляет рост всех этих опасных микроорганизмов.
Учитывая, что нос лабораторных грызунов слишком отличается от носа человека, а L. casei давно и успешно используются в пробиотиках для восстановления микрофлоры кишечника и влагалища, ученые провели предварительные испытания сразу на людях. Двадцати здоровым добровольцам в течение двух недель дважды в день вводили в нос спрей, содержащий эти лактобактерии. Оказалось, что процедура не вызывала негативных побочных эффектов, а сама бактерия благополучно колонизировала слизистые, сохраняясь в них продолжительное время: даже через две недели после введения спрея L. casei удавалось обнаружить в 10-35% исследованных образцов.
В конечном счете ученые надеются создать на основе лактобактерий назальный спрей, который может стать эффективным средством терапии хронических заболеваний верхних дыхательных путей человека.
Фото: https://www.flickr.com
: 31.05.2020
Источник
Нормализация слизистой оболочки полости носа как медико-социальная проблема
Наш организм может полноценно жить и развиваться лишь в том случае, если между ним и средой обитания постоянно происходит обмен веществ. Одной из важнейших форм связи организма с окружающей средой, не прерывающейся в течение всей жизни человека, является связь через дыхательную систему. Нос, являющийся начальным отделом дыхательного тракта, представляет собой мощный защитный барьер, информирующий центры о контакте с различными агентами внешней среды, осуществляющий кондиционирование вдыхаемого воздуха, задерживающий и обезвреживающий вещества, которые могут поступить в организм с воздухом [7].
Ведущая роль в защитной функции носа принадлежит слизистой оболочке, которая покрыта псевдомногослойным эпителием, состоящим из мерцательных, бокаловидных, а также коротких и длинных вставочных эпителиоцитов. Мерцательная клетка на своем свободном конце имеет многочисленные реснички.
![]() |
Рис. Строение слизистой оболочки полости носа |
Реснитчатые клетки имеют по 250-300 ресничек длиной 7 и высотой 0,3 микрона. Каждая ресничка состоит из 9 пар микротрубочек, расположенных в виде кольца и окружающих две непарные центральные микротрубочки. Движение ресничек мерцательного эпителия слизистой оболочки носа осуществляется посредством скольжения микротрубочек. Движение ресничек строго направлено — от преддверия полости носа в сторону носоглотки. Мукоцилиарный клиренс обеспечивается назальным секретом. Источник секрета, покрывающего эпителий полости носа, — слизистые железы слизистой оболочки носа, бокаловидные клетки, транссудация из субэпителиальных капилляров, слезных желез, секрет специализированных Боумановых желез из ольфакторной зоны носа [7] (рис.).
Объем назальной секреции за 24 ч составляет от 100 мл до 1-2 л. Слизистая оболочка задних двух третей полости носа обновляется каждые 10-15 мин. Функция ресничек оптимальна при температуре 28-33 °C, достаточном количестве секрета с рН 5,5-6,5. Потеря влаги, понижение температуры до 7-10 °C, увеличение рН секрета более 6,5 вызывает прекращение колебания ресничек [8, 11].
Слизистая оболочка полости носа является первым барьером защиты дыхательных путей, поэтому на слизистой оболочке полости носа ежесекундно осаждаются тысячи микроорганизмов. Большинство из них являются представителями сапрофитной микрофлоры и не причиняют человеку никакого вреда, тогда как другие способны спровоцировать развитие инфекционного заболевания. При инфекционном рините размножение микробов на слизистой носа приводит к ее повреждению и отслаиванию верхней части эпителия. Этот процесс и объясняет все проявления насморка: чувство жжения в носу, истечение слизи (экссудата), заложенность носа, изменения голоса (гнусавость) и др. [9].
Ринит редко бывает самостоятельным заболеванием. Чаще всего насморк является симптомом какой-либо другой нозологической формы. Насморк наблюдается при различных ОРВИ или ОРЗ (грипп, парагрипп, аденовирусная инфекция, корь и др.). Острые респираторные заболевания являются наиболее распространенными в структуре инфекционных заболеваний. В России ежегодно регистрируется около 50 млн случаев инфекционных заболеваний, из них до 90% случаев приходится на острые респираторные вирусные инфекции. При патологии ЛОР-органов в первую очередь страдает слизистая оболочка с ее железистыми клетками.
Помимо инфекционных заболеваний, в индустриально развитых странах в настоящее время от 10% до 20% населения страдают острыми аллергическими заболеваниями. Кроме того, в патогенезе воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей наряду с местным и общим воздействием возбудителя играют роль сенсибилизация организма и иммунологические сдвиги непосредственно в слизистой оболочке носа и околоносовых пазух [4].
Слизистая носа является той зоной, которая подвергается воздействию самых разнообразных инородных частиц. Молекулы аллергенов чрезвычайно быстро вызывают аллергическую реакцию, вследствие чего уже через минуту после проникновения аллергенов возникают чиханье, зуд в полости носа, ринорея [5, 6].
В качестве других этиологических факторов поражения слизистой оболочки могут быть неблагоприятная экология, профессиональные вредности, вредные привычки (табакокурение, наркомания). В городе, непосредственно у поверхности земли, обнаруживается наибольшая концентрация всех видов ксенобиотиков — свободно-радикальные соединения, канцерогены, соли тяжелых металлов, все виды аллергенов, ну и, конечно, патогенные микроорганизмы. Слизистая оболочка носа, полости рта и глотки находится в постоянном контакте с вдыхаемым воздухом и, таким образом, подвергается воздействию вредных факторов внешней среды, что приводит к ее отеку. В любом случае возникают условия, при которых слизистая носа легко инфицируется, реагируя появлением значительного отека [3].
Принимаемые при различных заболеваниях лекарственные препараты в качестве побочного действия часто дают субатрофию слизистой оболочки полости носа за счет системного действия, что особенно важно у представителей голосоречевых профессий в связи с наступающими изменениями в резонаторном тракте [1, 10].
При некоторых заболеваниях, например, при сахарном диабете, за счет нарушений в микроциркуляторном русле часто развиваются атрофические и субатрофические риниты. С учетом распространенности данного заболевания, в частности, в связи со снижением возраста впервые заболевших (трудоспособное население) проблемы увлажнения слизистой оболочки полости носа носят социальный характер.
Как показывают исследования, население планеты стареет, увеличивается средняя продолжительность жизни и соответственно возрастают требования к качеству жизни в данной группе населения. Известно, что со снижением уровня половых гормонов, обусловленных менопаузой у женщин и снижением функции половых желез у мужчин, вероятность развития субатрофических и атрофических процессов на коже и слизистых резко возрастает.
Таким образом, в нормализации функции слизистой оболочки полости носа ведущими направлениями терапии являются:
1) стимуляция кровообращения местного и общего, т. е. усиленное снабжение слизистой оболочки питательными веществами;
2) увлажнение слизистой оболочки носа и препятствование образованию корок;
3) борьба с местной патологической микрофлорой.
Таким принципам отвечают препараты топического действия, содержащие важнейшие микроэлементы, регулирующие реологические свойства слизи. Считается, что содержащиеся в изотоническом растворе микроэлементы, такие как Са, Fе, К, Мg, Сu, способствуют повышению двигательной активности ресничек, активизации репаративных процессов в клетках слизистой оболочки носа и нормализации функции ее желез [7]. Перечисленные микроэлементы содержатся в препаратах, которые готовят из морской воды, стерилизуя ее и доводя содержание солей до изотонической концентрации, и из воды минеральных источников, обладающей лечебными свойствами.
Известно, что морская вода очень полезна для человеческого организма, так как содержит много ценных микро- и макроэлементов. Морская вода активизирует все жизненные процессы организма, повышает его сопротивляемость к различным заболеваниям, она обладает местным антисептическим действием.
Целебные свойства морской воды:
- Промывание полости носа морской воды оказывает антибактериальное действие, смывая пыль, вирусы и бактерии.
- Полоскание горла теплой морской водой лечит заболевания горла и восстанавливает голосовые связки.
- Морские ванны и воздух стимулируют эндокриную систему.
- Морская вода ускоряет заживление ссадин и порезов благодаря содержанию большого количества солей и микроэлементов.
- Полоскание рта теплой морской водой укрепляет зубы и десны.
Одним из новых препаратов этой группы является Отривин Море [2], представляющий собой очищенный, деконтаминированный изотонический раствор океанической воды из Бретани, добываемой в экологически чистом районе Атлантического океана, богатой натуральными микроэлементами. Он содержит 18 минералов и микроэлементов.
Благодаря такому составу препарат Отривин Море идеально подходит для защиты слизистой оболочки носа от неблагоприятных условий города, а также для облегчения носового дыхания во время болезни. Отривин Море обеспечивает быструю элиминацию возбудителей и аллергенов, то есть многократно снижает их концентрацию и способствует механическому очищению поверхности слизистой оболочки носа. Помимо этого, Отривин Море стимулирует клетки мерцательного эпителия, способствует нормализации выработки слизи и ее разжижению, а также повышает местный иммунитет. Важным преимуществом препарата является отсутствие какого-либо системного действия на организм пациента, что крайне важно для людей, страдающих различными соматическими заболеваниями и опасающихся приема традиционных топических вазоконстрикторов из-за риска развития побочных эффектов. Кроме того, у пациента появляется возможность снизить дозировку других лекарственных средств, применяемых для комплексного лечения, и ускорить выздоровление.
Отривин Море можно использовать как в профилактических и лечебных целях, так и для ежедневной гигиены полости носа. Новинка не содержит консервантов и дополнительных химических ингредиентов. Основными показаниями для назначения препарата являются острый ринит (включая аллергический) и заложенность носа. При насморке и аллергии Отривин Море облегчает дыхание, деликатно очищая носовые ходы, а также оказывает антисептическое действие. Кроме того, средство можно использовать для гигиены полости носа перед применением других лекарственных препаратов. В целях профилактики возможно использование препарата Отривин Море в период эпидемий различных вирусных заболеваний, что препятствует развитию различных форм инфекционного процесса на слизистой носа. Препарат также может применяться с целью гигиены полости носа, эффективно очищая слизистую носа и бережно увлажняя ее. Натуральный состав Отривин Море не только обеспечит высокую безопасность проводимого лечения, но и позволяет применять препарат для промывания носа при аллергии.
Многие назальные спреи вызывают дискомфортные ощущения при их приеме, что связано с раздражением слизистой оболочки полости носа. Отривин Море в форме назального душа лишен данного побочного эффекта. Бережно промывая полость носа, препарат удаляет пыль, бактерии и секрет и предотвращает ее пересыхание, тем самым оберегая от раздражающего воздействия внешних факторов, что особенно важно людям, работающим в помещениях с чрезмерно сухим воздухом (например, там, где установлены кондиционеры или возле нагревательных приборов).
Большое значение имеет форма выпуска препарата. При использовании носовых капель большая часть введенного раствора стекает по дну полости носа в глотку. В этом случае не достигается необходимый лечебный эффект. В этом плане намного более выгодным выглядит назначение дозированных аэрозолей, так, особенностью препарата Отривин Море является выпуск в форме назального спрея.
Также Отривин Море можно использовать и для ежедневной гигиены полости носа. Эта процедура известна уже с древности и важна для нашего здоровья не менее, чем чистка зубов. В современном мире, в тесных и пыльных мегаполисах, ежедневное профилактическое промывание носа морской водой приобрело особую актуальность.
Для удобства пациентов Отривин Море выпускается во флакончиках оптимального объема — 50 и 100 мл, которые будут уместны и в домашней, и в дорожной аптечках. Кроме того, флакон Отривин Море снабжен универсальной насадкой, подходящей для всей семьи и может быть рекомендован детям с трехмесячного возраста. При этом распыляющий наконечник обеспечит аккуратное и равномерное увлажнение полости носа, а специальный клапан, защищающий лекарство от попадания в него микроорганизмов, гарантирует длительный срок использования после первого применения.
Таким образом, препарат Отривин Море является надежным средством, очищающим слизистую оболочку носа у взрослых и детей, восстанавливая ее физиологическую функцию, не вызывая при этом ее сухости и обладая стойким длительным эффектом, предотвращая тем самым развитие грозных осложнений и одновременно бережно воздействуя на ее структурные компоненты. Отривин Море может применяться как для лечения, так и для профилактики насморка, а также для защиты слизистой носа от раздражающего воздействия окружающей среды.
Литература
- Волошина И. А., Туровский А. Б. Ирригационная терапия атрофического ринита. С. 1906.
- Государственный реестр лекарственных средств. М.: МЗ РФ, 2008.
- Гуров А. А. Отек слизистой оболочки верхних дыхательных путей. Как с ним бороться? 1254 с.
- Карпова Е. П., Усеня Л. И. Топические деконгестанты для терапии воспалительных заболеваний полости носа и околоносовых пазух у детей. С. 18.
- Марков Г. И. Транспортная функция мерцательного эпителия слизистой оболочки полости носа при воспалительных заболеваниях // Вестник оториноларингологии. 1985. № 4. С. 36-37.
- Пальчун В. Т., Магомедов М. М., Лучихин Л. А. Оториноларингология. М.: Медицина. 2002. 576 с.
- Пискунов Г. З., Пискунов С. З. Клиническая ринология. М., 2002. 390 с.
- Плужников М. С., Шантуров А. Г., Лавренова Г. В., Носуля Е. В. Слизистая оболочка носа. Механизмы гомеостаза и гомокинеза. СПб. 1995. С. 5-18.
- Рязанцев С. В. Современные деконгестанты в комплексной терапии острых и хронических заболеваний ЛОР-органов // Российская оториноларингология. 2008, № 6 (19).
- Deitmer T., Scheffler R. The effect of different preparations of nasal decongestans in ciliary beat frequency in vitro // Rhinology. 1993; 31-151-3 (14).
- Satir P. How cillia move // Scientific American. 1974. Vol. 231. P. 45-46.
Н. Э. Бойкова, кандидат медицинских наук
Научно-клинический центр оториноларингологии Федерального медико-биологического агентства, Москва
Контактная информация об авторах для переписки: natella66@yandex.ru
Источник
Риноцитограмма — это исследование слизи из полости носа под микроскопом. Оно позволяет определить наличие в носовой слизи клеток, характерных для аллергических или инфекционных заболеваний, вызывающих ринит — воспаление слизистой оболочки носа. При длительном насморке в некоторых случаях определение вызвавшей его причины бывает затруднено. С этой целью и проводится риноцитограмма, которая позволяет выявить увеличенное количество эозинофилов, что служит дополнительным аргументом в пользу аллергической природы насморка. Аллергический и инфекционный ринит лечатся по-разному, именно поэтому важно определить причину насморка.
Референсные значения не приводятся.
Результат представляет собой описание общей цитологической картины с подсчетом количества лейкоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, эпителия мерцательного, лимфоцитов, макрофагов, слизи, эритроцитов, дрожжевых грибов, флоры. Врач интерпретирует результат (диф. диагностика ринита), оценивая соотношение количества клеток.
Синонимы русские
Риноцитограмма, цитологическое исследование секрета из полости носа, мазок на эозинофилию, исследование соскоба со слизистой оболочки полости носа, исследование назального секрета.
Синонимы английские
Cytologic study of respiratory tract, Nasal Smear, Nasal smear for eosinophils, Eosinophil smear.
Метод исследования
Микроскопия.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок из носа.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Исключить использование назальных спреев, капель, содержащих кортикостероиды, в течение 24 часов до исследования.
Общая информация об исследовании
Риноцитограмма — исследование выделений из носа под микроскопом. С ее помощью можно выявить изменения, характерные для аллергических реакций организма или для инфекции. Таким образом устанавливают причину воспаления слизистой оболочки носа (ринита).
В норме все стенки полости носа покрыты слизистой оболочкой с секретом, способствующим удалению пыли и микробов. Секрет обладает таким свойством благодаря наличию мерцательного эпителия, имеющего реснички, которые способны колебаться и перемещать слизь вместе с пылью и микробами.
Тем не менее в норме в полости носа обитает большое количество микробов (некоторые виды стафилококков, стрептококков и др), не причиняющих человеку вреда из-за иммунного ответа организма. Если по каким-либо причинам местный иммунитет снижается, микробы могут приводить к воспалению, возникает острый ринит — расстройство функции носа, сопровождающееся воспалительными изменениями слизистой оболочки и насморком. Кроме того, ринит могут вызывать вирусы, передающиеся воздушно-капельным путем, в том числе возбудители ОРЗ.
Снижение местного иммунитета может быть вызвано переохлаждением организма, снижением общего иммунитета человека. Развитию насморка также способствует замедление движения мерцательного эпителия.
В результате ответа иммунной системы в слизистой носа повышается количество лейкоцитов — белых кровяных телец. Существует несколько их разновидностей, при бактериальных инфекциях главную роль в защите организма играют нейтрофилы, при вирусных — лимфоциты. Также могут появляться макрофаги.
При аллергии на организм воздействует определенное вещество (аллерген), например пыльца, шерсть, пыль и т. д., к которому возникает повышенная чувствительность иммунной системы. Такая реакция приводит к выделению в слизистой оболочке носа определенных веществ (гистамина, брадикинина), вызывающих симптомы аллергии. При этом большее значение в данном процессе имеют такие клетки иммунной системы, как эозинофилы (одна из разновидностей лейкоцитов). При аллергии они могут в большом количестве появляться в крови, а также накапливаться в носовой слизи.
Кроме того, существует вазомоторный (нейровегетативный) ринит, при котором воздействие холода, прием некоторых лекарств, воздействие других физических или психоэмоциональных факторов вызывает острое набухание слизистой оболочки носа и изменение тонуса сосудов носовой полости.
При этом во всех случаях ринита происходит образование и выделение большого количества жидкости, что мы и называем насморком.
Аллергическая природа ринита часто остается невыявленной, хотя она достаточно распространена. Риноцитограмма может помочь в диагностике: особенность эозинофилов, появляющихся при аллергическом рините, состоит в том, что при специальной окраске (по Романовскому — Гимзе) они окрашиваются в красный цвет и становятся доступными для подсчета под микроскопом.
Для чего используется исследование?
При длительном насморке в некоторых случаях определение вызвавшей его причины бывает затруднено. С этой целью и проводится риноцитограмма, которая позволяет выявить увеличенное количество эозинофилов, что служит дополнительным аргументом в пользу аллергической природы насморка. Аллергический и инфекционный ринит лечатся по-разному, именно поэтому важно определить причину насморка.
Когда назначается исследование?
При длительном насморке (несколько недель и более), сопровождающемся заложенностью носа, чиханием неустановленного происхождения.
Что означают результаты?
Референсные значения для различных видов микроорганизмов зависят от их локализации (точки взятия биологического материала).
Повышение показателей
- Эозинофилы. Значительное повышение (более 10 % от общего количества лейкоцитов в мазке и более) количества эозинофилов свидетельствует в пользу аллергического происхождения насморка. В то же время следует иметь в виду, что отсутствие большого количества эозинофилов в мазке не позволяет достоверно исключить аллергическую природу заболевания. Уровень эозинофилов также может быть повышен при неаллергическом эозинофильном рините — заболевании, при котором другие признаки (помимо повышения количества эозинофилов в крови и носовой слизи) аллергии отсутствуют. Заболевание часто сопровождается полипами и отсутствием реакции на противоаллергические (антигистаминные) препараты.
- Нейтрофилы. Увеличение количества данных клеток в мазке может указывать на то, что причиной насморка являются инфекционные агенты (бактерии или вирусы). Повышение уровня нейтрофилов особенно характерно для острой стадии заболевания.
- Лимфоциты. Повышенное содержание лимфоцитов может быть связано с хроническим инфекционным воспалением слизистой оболочки носа.
- Эритроциты. Появление в мазке эритроцитов может свидетельствовать о повышенной проницаемости сосудистой стенки слизистой полости носа, что характерно для некоторых видов ринита, в частности вызванных дифтерией или гриппом.
Следует отметить, что повышение уровня нейтрофилов и лимфоцитов не является специфичным в отношении инфекции.
Снижение показателей
Отсутствие в мазке эозинофилов, нейтрофилов, других видов лейкоцитов может указывать на:
- вазомоторный ринит — насморк, не связанный с аллергией или инфекцией;
- ринит, связанный со злоупотреблением сосудосуживающими назальными спреями;
- ринит, вызванный другими причинами (гормональными нарушениями, нарушениями психоэмоционального состояния, нарушениями анатомии носовых ходов и др.).
Что может влиять на результат?
Использование назальных спреев, особенно кортикостероидов, может приводить к ложноотрицательным результатам в отношении эозинофилии.
Тот же эффект иногда наблюдается при использовании таблеток, содержащих кортикостероиды, и антигистаминных (противоаллергических) препаратов.
Важные замечания
- Следует оценивать результаты исследования, сопоставляя данные истории развития заболевания, других исследований и симптомы.
- Для повышения достоверности результатов рекомендуется повторить обследование через 1-2 недели.
Также рекомендуется
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
- Суммарные иммуноглобулины E (IgE) в сыворотке
Кто назначает исследование?
Врач-терапевт, врач общей практики, врач-оториноларинголог, аллерголог-иммунолог.
Литература
- Пальчун В. Т. Оториноларингология. Национальное руководство, 2008, ГЭОТАР-медиа. 919 с.
- V Paleri, J Hill. ENT Infections: An Atlas of Investigation and Management, 2010, Atlas Medical Publishing Ltd. P. 116.
- Dan L. Longo, Dennis L. Kasper,J. Larry Jameson, Anthony S. Fauci, Harrison’s principles of internal medicine (18th ed.). New York: McGraw-Hill Medical Publishing Division, 2011.
Источник